詳細介紹
禽白血病病毒RT-PCR檢測試劑盒禽白血?。ˋL),是由禽白血病病毒(ALV)引起的禽類各種良性和惡性腫瘤的一群疾病,是危害養禽業的主要疾病之一。各種年齡雞均可感染發病,患病
雞極度消瘦,生長發育不良,免疫反應低下,產蛋率下降,死亡率高,給養禽業
造成重大經濟損失。為此本公司開發了本產品,針對ALV的gag基因設計引物,
建立了檢測ALV的實時RT-PCR,為ALV的快速診斷、監測及分子流行病學調查
提供了有力工具。
禽白血病病毒RT-PCR檢測試劑盒具有下列特點:
1. 用于 ALV 的定性鑒定檢測和分子流行病學調查。
2. 能對樣品中 ALV 進行快速檢測,具有良好的特異性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒,減少了操作步驟,降低了操作誤差。
規格及成分 成分 編號 50 次塑料袋包裝
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× 91202A 750 μL
MMLV-Taq Mix 91202B 100 μL
ALV 專一性引物對 yw13071308 100 μL
ALV 陽性對照 yw13091310 50 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊 1 份
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑 一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout
使用方法 一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化ALV樣品的RNA,也可以另購本公司的一管式病毒RANout或柱式病毒 RNAout,上述兩款產品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對
照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。
zui在專門的區域操作。
三、設置 RT-PCR 反應(30 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× 15 uL 15 uL 15 uL
ALV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 RNA 1-5 uL 無 無
ALV 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 28 uL 28 uL 28 uL
MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 RT-PCR。
過程 溫度 時間
逆轉錄 42℃ 30 min
預變性 95℃ 3 min
PCR 反應
(35 個循環)
95℃ 30 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測 RT-PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 91 bp。
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