細胞名稱：人表皮癌細胞A-431
生長特性：貼壁  懸浮 半懸浮半貼壁（詳情可咨詢我們）
生長條件：詳情索取該產品說明書
培養條件：90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養溫度：37℃
空氣條件：5% CO2,95% AIR
傳代方法：1:2傳代，2~3天換液
凍存條件：0%FBS+10%DMSO

皮膚癌細胞株A-431源自一位85歲女性，是D.J.Giard等人建立的一系列細胞株中的一株。 它在抗胸腺細胞球蛋白、血清處理的NIH 瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下腫瘤，在普通成纖維細胞和瓊脂上形成克隆。 這是一個超三倍體人細胞株。 
組織來源：皮膚；上皮；皮膚癌 
細胞形態：上皮細胞 

培養條件 

推薦自配培養基：90%DMEM高糖

人表皮癌細胞A-431，使用方法
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞*貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml*培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮*培養基繼續培養。
，原代細胞與細胞系有什么區別？細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫療或科研。實際上，連續細胞系可以用大量次培養基培養，隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
1、倍增和代數有什么區別？倍增是培養物中細胞總數加倍，通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養瓶中移出，傳代培養過程的次數，傳代培養的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。
2、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經驗才能開始正常人類細胞培養？推薦有經驗者在無菌環境下用層流凈化罩工作，如果有經驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養的初學者或打算建立細胞培養實驗室，我們會為你提供幫助。請的細胞培養專家。
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