詳細介紹
1.產品名稱:小鼠腎小管上皮細胞
2.組織來源:腎組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠腎小管上皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質迷路內,于腎小體附近高度蟠曲;遠端小管曲部也稱為遠曲小管,位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞,腎小管上皮細胞的分離、培養是研究腎臟疾病的一項重要技術,目前該細胞分離方法有酶分離法、化學分離法篩網分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能:①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營養物質進入終尿;③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子,通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應;④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深,腎小管上皮細胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細胞模型,在腎小管間質疾病的發病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
本公司生產的采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化,結合上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-M062)作為體外培養的培養基。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和
技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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