詳細介紹
1.產品名稱:小鼠輸尿管上皮細胞
2.組織來源:輸尿管組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠輸尿管上皮細胞分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,下連膀胱,是一對細長的管道,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結構,沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個在越過小骨盆入口處;后一個在進入膀胱壁的內部。這些狹窄是結石、血及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構,即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段,也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動脈處;盆段,自髂動脈到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細胞;固有層由細密的結締組織構成,內含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內縱和外環兩層平滑肌組成;外膜為疏松結締組織,營養血管由外膜進入輸尿管。其中,輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。
本公司生產的采用先中性蛋白酶消化、然后機械分離法使輸尿管分層、后膠原酶消化,并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-M071)作為體外培養的培養基。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和
技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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