詳細介紹
1.產品名稱:小鼠皮膚肥大細胞
2.組織來源:皮膚組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠皮膚肥大細胞分離自皮膚組織;皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細胞因子,參與免疫調節(T細胞、B細胞、APC細胞活化)。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細胞同樣,具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質,可在組織內引起速發型過敏反應(炎癥)。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸,使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形,細胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細胞中央。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形,細胞質中充滿大小*、染成藍紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。
本公司生產的采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-M089)作為體外培養的培養基。
三、使用方法
在技術部標準操作流程下,小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代;建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待
細胞回縮變圓后,再加入5ml*培養基終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*
培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和
技術部溝通;由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時
和我們,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。
備注:由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
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