詳細介紹
1.產品名稱:大鼠胰腺星狀細胞
2.組織來源:胰腺組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
大鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應細胞,PSC分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達Desmin蛋白,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態與激活態兩種,并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC胞質內富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達Desmin。激活狀態PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發現,原代分離的細胞培養6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin,48h后Desmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養時間的增長和傳代次數的增加,細胞表達alpha-SMA,而不再表達Desmin,說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養第6d大多數細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,目前研究發現:胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,導致細胞形態、功能發生變化,促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。
本公司生產的采用膠原酶制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經Desmin、alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基(產品貨號:CM-R016)作為體外培養的培養基。
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯系。并進行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。
2.將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩定細胞狀態。
3.預熱培養基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5.①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養。
注:
培養瓶里的培養基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基。(這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題,煩請當天盡快聯系并提供圖片,以便售后處理。7天內反饋,細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理;7天內未接到任何反饋視為合格,不予免費售后
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