Lwnt-3a小鼠皮下結締組織細胞系L-M（TK-） cells （ATCC CCL-1.3） 用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選穩轉株。 Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。

Lwnt-3a小鼠皮下結締組織細胞系背景資料：

L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達載體轉染并在含G418的培養基中篩選穩轉株。 Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前生產Wnt-3A條件培養基的來源。 由于這種條件培養基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養基的實驗有必要用其來源細胞株(ATCC CRL-2648)作對照。

規格：5×105cells/瓶
培養條件：37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，無菌恒溫培養。
細胞數量：1× 106個
細胞傳代：1:4~1:6傳代；每周換液2~3次
細胞活力:95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養條件:DMEM（高糖） +10% FBS；37℃，5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細胞凍存：液氮凍存?????

T25瓶細胞處理方法

收到Lwnt-3a小鼠皮下結締組織細胞系后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱*培養基（含1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

②若細胞密度較大，達到80%以上，將細胞傳代培養。

注：

培養瓶里的培養基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基。（這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度）   收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題，請當天反饋并提供圖片，且保存前三天照片以便分析。7天內反饋，細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理；7天內未接到任何反饋視為合格，不予免費售后。