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CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞二氫葉酸還原酶缺陷

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更新時間:2024-11-08 13:55:38瀏覽次數:365

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產品簡介

供貨周期 一周 規格 5×105cells/瓶
CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞二氫葉酸還原酶缺陷這是V79細胞(見V79-4,ATCC CCL-93)的一個用乙基甲基苯磺酸處理的衍生克隆。 細胞的半乳糖激酶缺失,能抗2-脫氧半乳糖和8-氮雜鳥嘌呤。

詳細介紹

CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞二氫葉酸還原酶缺陷1961年3月,I.A. Macpherson和M.G.P. Stoker從1日齡的倉鼠建立了BHK-21 (C-13)的親本。隨后84天連續培養,僅中斷8天進行凍存,通過單細胞分離建立了13號克隆。這株細胞可用作轉染宿主,用于表達包含選擇及擴增標記的DNA(如Factor VIII,見ATCC CRL-8544)的載體。 

規格:5×105cells/瓶
培養條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養。
細胞數量:1× 106個
細胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細胞凍存:液氮凍存?????

T25瓶細胞處理方法

收到CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞二氫葉酸還原酶缺陷后,檢查外包裝是否完整,細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯系。并進行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理,以穩定細胞狀態。

3. 預熱*培養基(含1%雙抗)。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照保存(40×,100×,200×各一張)。

5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。

②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養。

注:

培養瓶里的培養基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基。(這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度)   收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題,請當天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內反饋,細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理;7天內未接到任何反饋視為合格,不予免費售后。

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