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上海雅吉生物的桿狀病毒穿梭載體bacmid小量抽提試劑盒(Baculovirus Shuttle Vector Bacmid Mini Preparation Kit, 簡稱Bacmid Miniprep Kit)是一種從大腸桿菌DH10Bac中簡單快速抽提高質量可*應用于昆蟲細胞轉染的bacmid的試劑盒。
      主要特點：簡單快速，不使用劇毒試劑，無須酚氯抽提，無須過柱純化，有效解決bacmid分子量大、抽提難度高等系列問題，確保抽提獲得的bacmid可*用于昆蟲細胞轉染。
      當目的基因被插入到pFastBac系列載體中構建成目的重組質粒后，該重組質粒可用于轉化大腸桿菌DH10Bac從而發生位點特異的轉座(site-specific transposition)，藍白斑篩選和PCR鑒定篩選含有重組bacmid的重組子，再使用本試劑盒進行bacmid的小量抽提即可獲得可轉染昆蟲細胞的bacmid DNA。
      桿狀病毒穿梭載體bacmid小量抽提試劑盒在抽提bacmid的同時，也會抽提輔助質粒(helper plasmid)和未重組的pFastBac質粒。抽提獲得的bacmid等質粒混合物可以直接用于轉染昆蟲細胞以包裝桿狀病毒，zui終用于目的蛋白在昆蟲細胞中的大量表達。
      Bac-to-Bac桿狀病毒表達系統是由Luckow等人于1993年發展的一種快速而有效產生重組桿狀病毒的方法。該系統主要包括以下兩個組分：(1)用于插入目的基因的pFastBac載體，目的基因插入后受桿狀病毒特異性啟動子(baculovirus-specific promoter)調控表達；(2)含桿狀病毒穿梭載體bacmid (bMON14272, 136kb)和輔助質粒(helper plasmid，用于表達轉座必須的轉座蛋白)的大腸桿菌DH10Bac宿主菌株。將pfastBac重組質粒轉化該菌株可發生pfastBac重組質粒中mini-Tn7元件和bacmid上的mini-attTN7發生轉座，從而形成重組的bacmid。
      利用Bac-to-Bac桿狀病毒感染昆蟲細胞產生重組蛋白主要包括以下實驗步驟：(1)把目的基因克隆到pFastBac載體產生重組質粒；(2)轉化pFastBac重組質粒到DH10Bac大腸桿菌感受態細胞產生重組bacmid；(3)利用提取重組bacmid DNA；(4)將重組bacmid DNA轉染進入昆蟲細胞(推薦使用C0551 LipoInsect™轉染試劑)以產生重組桿狀病毒；(5)擴增重組的桿狀病毒并用其感染昆蟲細胞以大規模表達重組目的蛋白。
      本試劑盒抽提獲得的高質量bacmid DNA可以直接用于轉染昆蟲細胞，生產的LipoInsect™轉染試劑(C0551)適用于將pFastBac等桿狀病毒表達載體制備的bacmid轉染到Sf9、Sf21和High Five™等昆蟲細胞以用于Bac-to-Bac®、BaculoDirect™和InsectSelect™表達系統的蛋白表達。LipoInsect™轉染試劑的轉染效率非常高，對昆蟲細胞Sf9的實測陽性率可達98%以上。
      關于昆蟲細胞系統的蛋白表達與純化的詳細介紹 
      一個包裝的本產品可以進行50次bacmid的小量抽提。

包裝清單：

保存條件：
      室溫保存，一年有效。
注意事項： 
      *次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加入到溶液I (懸浮液)中，混勻，并在瓶上做好標記。加入RNase A后須4℃存放。
      溫度較低時，溶液II和溶液III可能會有沉淀產生。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，37℃水浴加熱溶解，混勻后使用。
      溶液II請勿過分劇烈混勻，否則會產生大量氣泡。
      溶液II使用完后，請注意蓋緊瓶蓋，以避免被空氣中二氧化碳酸化。
      本試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行，但在4℃進行離心也是可以的。
      溶液II有強堿性，溶液II和溶液III對人體都有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護。
      *于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。