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產品簡介
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒（綠色熒光）（One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit）為您提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織，只要經過一步染色反應，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。
詳細介紹
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)為您提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織，只要經過一步染色反應，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。
細胞在發生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實際上大多數情況下所謂的FITC即為fluorescein。
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)有如下優點
(1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色明亮，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。
(3)快速：僅需約1-2個小時即可完成。
(4)方便：只需一步染色反應，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進行多步操作。
(5)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。(6) 實測效果好：參考圖1，本試劑盒的實際檢測效果和國外同類產品相當。
圖1. 一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)的檢測效果以及和Roche公司同類產品檢測效果的比較。A. 本試劑盒和Roche公司同類試劑盒分別檢測正常HeLa細胞和經DNase I處理的HeLa細胞的效果圖，圖中的綠色熒光為TUNEL染色陽性細胞。B. 本試劑盒和Roche公司同類試劑盒分別檢測正常HeLa細胞和經10μM喜樹堿(Camptothecin)處理24小時的HeLa細胞的效果圖。無論是經DNase I處理的陽性細胞樣品，還是使用10μM喜樹堿處理的陽性細胞樣品，本試劑盒和Roche公司的同類試劑盒的效果相當。本圖中的染色實驗均在12孔板中進行。本圖僅作參考，不同的樣品不同的檢測條件，實際獲得的結果可能有較明顯的差別。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區分開，另一方面也不會把射線等誘導發生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，同時檢測多個凋亡指標。
本試劑盒足夠檢測20個樣品。
包裝清單：
產品編號 產品名稱 包裝
C1086-1 TdT酶 100μl
C1086-2 熒光標記液 900μl
C1086-3 TdT酶稀釋液(選用) 500μl
— 說明書 1份
保存條件：
-20℃保存，熒光標記液需避光保存。
注意事項：
需自備用于洗滌細胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(P0126)，用于固定的4%多聚甲醛或向訂購免疫染色固定液(P0098)，同時需自備含0.3% Triton X-100的PBS或向訂購免疫染色強力通透液(P0097)。
如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K，二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向訂購。
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)*于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。