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產品簡介
U-937；人組織細胞淋巴瘤細胞是T25培養瓶直接發貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T25瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態（有條件可以拍下此時細胞照片）。將細胞放入37度培養箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T25中培養基取出裝好備用，如細胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6mL培養基放回培養箱繼續培養即可。
詳細介紹
1、細胞名稱：U-937；人組織細胞淋巴瘤細胞
2、生長特性： □ 貼壁 （貼壁不牢容易脫落，消化無需胰酶請謹慎操作。）
3、細胞生長條件：
培養條件 | 90%DMEM（高糖）+10%FBS+1%P/S |
溫度 | 37℃ |
空氣條件 | 5% CO2,* AIR |
傳代方法 | 1:2傳代，2~3天換液 |
凍存條件 | 90%FBS+10%DMSO |
4.U-937；人組織細胞淋巴瘤細胞背景資料：我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時，可以產生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
二．使用方法
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置3-4小時以穩定細胞狀態，然后換用新鮮*培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）用5-6ml*培養基輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml*培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞*貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml*培養基重懸，接種25cm2培養瓶，于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮*培養基繼續培養。
T25瓶處理方法
收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題。并進行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。
3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。
5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。
②若細胞密度較大，達到80%以上，將細胞傳代培養。
注：
培養瓶里的培養基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養基。由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基。（這里是針對原來*培養基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度） 收到細胞后如細胞狀態不佳或培養中遇到問題，煩請當天盡快并提供圖片，以便售后處理。7天內反饋，細胞本身問題免費重發如人為原因導致可根據實際情況酌情處理；7天內未接到任何反饋視為合格，不予免費售后