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       目前，免疫學檢驗中的標記技術主要包括酶免疫技術、熒光免疫技術、放射免疫技術、金免疫技術、化學發光免疫技術等。其中酶免疫技術是以酶標記的抗體（抗原）作為主要試劑，將抗原抗體反應的特異性和酶催化底物反應的性和專一性結合起來的一種免疫檢測技術。作為經典的三大標記技術之一，酶免疫技術在檢驗醫學中得到廣泛應用并不斷得到更新。

一、常用的酶及顯色底物

　　在酶免疫技術中用于標記的酶應具有催化活性高、催化專一性強；與抗原抗體偶聯后不影響抗原抗體的免疫反應性和酶活性；催化的底物易于配制、保存且催化底物產生的信號產物易于觀察和檢測；對人無害且價廉、易得等特點，目前常用的酶及底物見表1。

表1 常用酶及底物

常用酶 底物 加終止液前顏色 加終止液后顏色

辣根過氧化物酶（HRP） 鄰苯二胺（OPD） 橙黃色 棕黃色

RZ>3.1 四甲基聯苯胺（TMB） 藍色 黃色

堿性磷酸酶（AP） 對硝基苯磷酸酯（p-NPP） 黃色 黃色

二、標記物的制備

　　在酶免疫技術中制備標記物的抗原應純度高、抗原性完整；制備標記物的抗體應特異性好、效價高、親和力強、比活性高、能批量和易于分離純化。

　　制備酶標記物的方法應符合簡單、產量高；避免酶、抗體（抗原）、酶標記物各自形成聚合物；標記反應不影響酶的活性和抗原抗體的免疫反應性等原則。標記物制備的方法基本屬于兩類：

（一） 交聯法

　　交聯法是以一可同時與酶和抗體（抗原）結合的 交聯劑作為“橋”，分別連接酶與抗體（抗原）的方法，此類方法中目前zui常用的是戊二醛交聯法，形成的結合物為：酶-戊二醛-抗體（抗原）

（二） 直接法

　　直接法是用一活化劑首先將酶活化，被活化的酶分子上的基團直接可與抗體（抗原）結合形成標記物，如過碘酸鈉法。形成的結合物為：酶-抗體（抗原）。

三、酶免疫技術類型

　　酶免疫技術按照抗原抗體系統是定位于組織細胞上還是存在于液體樣品中分為酶免疫組化技術和酶免疫測定（EIA），酶免疫測定又可分為均相酶免疫測定和異相酶免疫測定。