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禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-14 12:33:45瀏覽次數:231

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50T
應用領域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)RTPCR 儲存條件 -20℃避光保存,避免反復凍融
分類 PCR檢測試劑盒    
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詳細介紹

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

英文名稱

規格

禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒

Avian Infectious Bronchitis   Virus(AIBV)RTPCR

50T

儲存條件:
僅用于科研14或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3.
細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20
,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

詳1.png

定量PCR方法:

熒光定量PCR探針法

熒光定量PCR SYBR Green染料法

快速PCR

多重 PCR

探針法即除了引物外另外設置一個探針,在探針的兩端分別帶上發光集團和淬滅集團,這個時候,兩個平衡不發光,但是當DNA通過引物合成的時候,探針被折斷,釋放出發光集團和淬滅集團,兩個距離較遠,發光集團產生熒光,被機器收集到信號,從而檢測基因的量

染料能夠與雙鏈結合,當PCR擴增的時候,染料結合到DNA上,從而發光,單個的染料不發光,這樣就能收集到信號,我們可以看出,染料法特異性不強,只要是雙鏈的DNA都回結合發光。

在快速PCR中,通過縮減PCR步驟所需時間來完成更快的擴增,且不會影響擴增產量和效率。快速循環條件尤其適用于具有高擴增能力的DNA聚合酶,這類聚合酶在每個結合中可引入更多的核苷酸。高合成能力 Taq 聚合酶所需的延伸時間僅占低合成能力Taq聚合酶所需時間的1/21/3,卻能維持較高的擴增效率。此外,如果引物的退火和延伸溫度相差無幾,則可將它們合并為一步,以進一步縮短PCR時間。這一過程也被稱為 兩步PCR法。

多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。


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PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度
Goat Anti-Guinea IgG/Cy5.5 Cy5.5
標記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

FAM123B: 腎母細胞瘤X蛋白抗體 0.2ml

成骨特異性轉錄因子抗體 Anti-CBFA1/RUNX2 0.1ml

Anti-Notch3/FITC 熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh POC5 細胞中心粒蛋白抗體 規格 0.2ml

Anti-TORC1/CRTC1/FITC 熒光素標記環腺苷酸應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
小鼠周期素依賴性抑制因子2A(CDKN2A)ELISA試劑盒 ,英文名: CDKN2A ELISA Kit

犬雙氫睪酮(DHT)ELISA檢測試劑盒CanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T

犬透明質酸酶2(HAase 2)免疫試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人腫瘤壞死因子β(TNFβ)規格:96T/48T

超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解樣品制備試劑盒50

RatgranzymesB,Gzms-BELISA試劑盒大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
禽傳染性支氣管炎病毒荷蘭株PCR檢測試劑盒2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名:2-氨基-4-并噻唑  分子式:C8H8N2S  度:98.0%      小鼠環0酸鳥苷   英文名稱:   cyclic adenosine monophosphate   規格:   48T/96T   英文縮寫:   cGMP

2-Amino-4'-fluorobenzophenone  3800/6/4  中文名:  分子式:C13H10FNO  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠睫狀神經營養因子   英文名稱:   ciliary neuroophic factor   規格:   48T/96T   英文縮寫:   CF

2-Amino-4-chlorobenzothiazole  19952-47-7  中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式:C7H5ClN2S  度:98.0%  關鍵詞:    白細胞分化抗原14   英文名稱:   cluster of differeiation aigen 14   規格:   48T/96T   英文縮寫:   CD14

2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名:2-氨基-3-甲酸  分子式:C8H9NO2  度:98.0%      可溶性細胞表面分化抗原40配體   英文名稱:   Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand   規格:   48T/96T   英文縮寫:   sCD40L

2-Amino-3-hydroxyanthraquinone  117-77-1  中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌  分子式:C14H9NO3  度:98.0%      小鼠Aelisa試劑盒   小鼠A試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠A試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠A試劑盒、小鼠Aeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標記 6 個離心管,分別為 765432
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。


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