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進口elisa試劑盒技術和WESTERN的不同?

閱讀:392          發布時間:2018-8-17

     進口elisa試劑盒Western Blot與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

免疫學三大工具,免疫組化、Western、ELISA,分別用于定位,定性和定量,各有各的功能。
 Western用于測分子量,ELISA用于測濃度。
    他們在測量前都要一個尺子(標準),但Western的尺子上標的是分子量(KD),ELISA的尺子上標的是濃度。
   Western用的是蛋白MARKER(已知大小的幾條蛋白),與蛋白一起電泳(不同泳道),實驗結束后知道目標蛋白的大小。
     進口elisa試劑盒用的是標準品(已知濃度的蛋白,自己稀釋成不同濃度),與未知相本一起反應(不同孔),實驗結束后判斷目標蛋白的濃度。
    至于他們的后期原理,都是用抗體與目標蛋白反應,再加一個HRP標記的二抗,HRP可以讓DAB顯色(Western是DAB或者ECL發光,在膜上顯色,而ELISA用TMB顯色,顏色在孔里面,)
   當然,實際操作也沒這么簡單,但后期利用的原理是相當的。

 KLF樣轉錄因子8抗體 SSDD/Steroid sulfatase

 KT3 tag抗體 SSB/La

 k輕鏈抗體 SSA/52KDa Ro

 Lgr5/GPR49抗體 srGAP3

 LIX1抗體 SRG11/Spata17

 Lpin1 抗體 SREBP-2

 Lpin1 抗體 SRF/SAP2/MCM1

 LRIG1抗體 SREBP-1

 LRIG2抗體 SRC

 LRIG3抗體 SPY

 LY75抗體 Spindlin 1

 L-瓜氨酸抗體 SPHK2
進口elisa試劑盒

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