詳細(xì)介紹
小鼠原代DC細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠原代DC細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代DC細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代DC細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代樹突狀細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代DC細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞,小鼠原成骨細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞系,LM-6細(xì)胞 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體 |
CCDC38: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體 0.2ml | 酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體 |
HAPLN2: 透明質(zhì)酸及粘蛋白2抗體 0.2ml | Anti-ATP2c1/Ca++ ATPase/FITC 熒光素標(biāo)記鈣離子ATP酶通道蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Somatostatin Receptor 1: 受體1抗體 0.1ml | HCMV/Cytomegalovirus Glycoprotein B: 人巨細(xì)胞病毒抗體 0.1ml |
Anti-CDK8/FITC 熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | DHEA-S ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯 96T |
酪蛋白激酶3抗體 | 小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HFSF細(xì)胞,人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞 啤酒酵母 小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC | TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 |
Anti-SARS putative orflab polyprotein 抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
體細(xì)胞;HEL | NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維 5×106cells/瓶×2 |
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 | 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 |
酸化原癌基因c-Jun抗體 | 小鼠原代DC細(xì)胞專用培養(yǎng)基ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | THY1 Others Rat 大鼠 CD90 / THY-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
PFKFB3 Others Human 人 PFK2 / PFKFB3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8 |