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詳細(xì)介紹
兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代神經(jīng)元細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；-20℃，避光，保存6個月。
1）復(fù)蘇兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA 小鼠細(xì)胞瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞，NG108-15[108CC15]細(xì)胞 LM8細(xì)胞，C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞 | Rhesus antibody Rh A4GALT/CD77 α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1 規(guī)格 0.2ml |
CLK2： 細(xì)胞分裂周期樣激酶2抗體 0.2ml | Anti-Hpt/HP 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
HBZ： 血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體 0.2ml | Anti-ATF2/FITC 熒光素標(biāo)記活化復(fù)制因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
SOX2： 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 0.1ml | phospho-HP1 alpha (Tyr24)： 0酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) 1ml |
Anti-Cdc34/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期調(diào)控因子34IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | T3 ELISA Kit 大鼠狀腺原酸 96T |
Neurokin B receptor： 激肽B受體抗體 0.2ml | 人牙周膜成纖維細(xì)胞HPLF |
AML-12小鼠正常肝細(xì)胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS | COCH Others Human 人 COCH / Cochlin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Anti-phospho GAP-43(pSer41)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化生長相關(guān)蛋白43抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系 其它 |
Anti-phospho-RUNX1(Ser303) 0酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
EJ(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 細(xì)胞名稱 種屬 |
ICAM-2： 細(xì)胞間粘附分子-2抗體 0.2ml | NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
Rhesus antibody Rh IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml | 兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927 人脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
CL-0393NCI-H209(人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
1.使用兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會有少量絮狀物析出，不影響兔原代下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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