詳細(xì)介紹
兔原代心肌干細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代心肌干細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代心肌干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代心肌干細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代心肌干細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代心肌干細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
HUtMEC-c 人子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUtMEC) 500,000cells 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | Rhesus antibody Rh PTPN6/SHP1 蛋白酪0酸酶1C抗體 規(guī)格 0.1ml |
E2(Mouse Estradiol)ELISA Kit 小鼠雌二醇 96T | RPLP0: 酸性核糖體0蛋白大亞基P0抗體 0.1ml |
Anti-GAPDH /FITC 熒光素標(biāo)記3-0酸甘油醛脫氫酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 2-Mar: 膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 0.2ml |
Nogo受體作用蛋白抗體 Anti-Lingo-1 0.2ml | Anti-SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
MCM7/CDC47: 染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 規(guī)格 1ml |
8-iso-PG ELISA Kit 大鼠8異前列腺素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2 |
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3/e細(xì)胞 J774A1(單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞) | RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗IgM (10或15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml | MDA-MB-157(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 R 1610(中國(guó)倉(cāng)鼠體細(xì)胞) |
Ovalbumin: 雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 0.1ml | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 | CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO |
IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml | 兔原代心肌干細(xì)胞專用培養(yǎng)基IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1008 人少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | HRAS Others Human 人 HRAS / GTPase Hras 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
A-673細(xì)胞,橫紋肌瘤細(xì)胞 Hela細(xì)胞耐藥亞株,Hela/DDP細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1 | KM小鼠子瘤株;U14 |