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詳細(xì)介紹
兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.使用兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Rhesus antibody Rh Quiescin Q6/QSOX1 巰基氧化酶1抗體 規(guī)格 0.2ml |
PCNA(Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體 96T | Regucalcin/SMP30： 衰老標(biāo)記蛋白30抗體 0.1ml |
Anti-phospho-GAB2 (Ser623) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化接頭蛋白Gab 2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | MMP-3： 基質(zhì)金屬蛋白酶3抗體 0.1ml |
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1 0.1ml | Anti-Cx32/FITC 熒光素標(biāo)記間隙連接蛋白32抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
MLX： 轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLF2 肺Kruppel樣因子抗體 規(guī)格 0.2ml |
ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C | CLEC14A Others Rat 大鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
IgM/Gold 金標(biāo)記鼠抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | 人張氏肝細(xì)胞;Chang liver 人上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Oncostatin M： 癌基因蛋白抑瘤素M抗體 0.2ml | EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
lovo, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | EAC 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 |
Anti-CACNA1G/Cav3.1 /FITC 熒光素標(biāo)記電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1 |
IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml | 兔原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞RM |
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | MET Others Human 人 c-MET / HGFR (aa 956-1390) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CM-R011大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 |
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