詳細(xì)介紹
兔原代甲狀旁腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代甲狀旁腺細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代甲狀旁腺細(xì)胞胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于兔原代甲狀旁腺細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Rhesus antibody Rh Rab25 癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體 規(guī)格 0.2ml |
IFA(Human intrinsic factor antibody) ELISA Kit 人抗內(nèi)因子抗體 96T | RNF11: 環(huán)指蛋白11抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-Gab1 (Tyr627) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化接頭蛋白Gab 1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 5 MethylCytosine: 5甲基胞嘧啶抗體 0.1ml |
CD4抗體 Anti-CD4 0.1ml | Anti-CTSC/PALS/DPP-I/FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
MT-ND6: NADH復(fù)合體6抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHDC8A KLHDC8A蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
C1q rat (ELISA Kit) 大鼠補(bǔ)體片斷C1qMulti-class antibodies規(guī)格: 96T | 人母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5Y |
CNE1細(xì)胞,人鼻咽癌細(xì)胞(高分化) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,P3-X63-Ag8.653細(xì)胞 草魚肝臟細(xì)胞;L8824 | FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Goat Anti-human IgA/Gold 金標(biāo)記羊抗人IgA(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml | SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞) |
ompF: 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗體 1ml | NHEK-c adult 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)成年單一捐獻(xiàn)者 500,000cells 原代骨細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1ml |
kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株 | 小鼠T淋巴瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA |
Anti-cath-D/CD /FITC 熒光素標(biāo)記組織蛋白酶D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AM-a |
IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml | 兔原代甲狀旁腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基NBL1 Others Human 人 DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 | T-112B乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL |
1.使用兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響兔原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。