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詳細(xì)介紹
兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體元 Rattus | Rhesus antibody Rh Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 規(guī)格 0.2ml |
Apl/APA(Human anti-phospholipid antibody) ELISA Kit 人抗0脂抗體 96T | RNF93： 環(huán)指蛋白93抗體 0.2ml |
Anti-FST/FITC 熒光素標(biāo)記抗卵泡抑素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Angiotensin II Type 2 Receptor： 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml |
過氧化酶活化增生受體γ抗體 Anti-PPARγ 0.1ml | Anti-CTBP1/FITC 熒光素標(biāo)記C端結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
p95 NBS1： 細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml |
Hyp ELISA Kit 大鼠羥Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1 |
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 非洲綠猴腎，BS-C-1細(xì)胞 hFOB 1.19(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞) | MAPK14 Others Human 人 p38 alpha / MAPK14 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Goat Anti-bovine IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗IgG(10/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml | 人前列腺平滑肌細(xì)胞(HPSMC)(5×105) 細(xì)胞名稱 種屬 |
OPCML： 樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 0.1ml | 人上皮細(xì)胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 | CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 標(biāo)簽) |
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml | 兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562 大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml | CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
801-D細(xì)胞，人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控，含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA8細(xì)胞 CM-M026小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 |
1.使用兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響兔原代骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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