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詳細(xì)介紹
人原代支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代支氣管上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代支氣管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于人原代支氣管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | Phospho-Gab1 (Tyr659)： 0酸化接頭蛋白Gab 1抗體 0.1ml |
SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit 人超氧化物歧化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | C1orf187： 1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體 0.2ml |
ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原 0.5mg | Anterior Gradient 2： 前梯度同源蛋白2抗體 0.1ml |
PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰基醇蛋白聚糖-3(多肽) 0.5mg |
APC5： 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 0.2ml | Anti-LILRB3/CD85a/PirB 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽 96T | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 | FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人瘤病毒16型E7抗體 Anti-E7 protein 0.1ml | CL-0258BC-019(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
Creatine kinase B type： 腦肌酸激酶BCK抗體 0.2ml | 人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
ECV304細(xì)胞，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H345細(xì)胞 CL-0403NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(ROPC)(5×105) |
TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激素受體相關(guān)蛋白/孤兒素受體相關(guān)蛋白(抗原) 0.5mg | 小鼠干細(xì)胞 小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞，Sol8細(xì)胞 S-180(腹水瘤細(xì)胞) |
Anti-phospho-IKK alpha (Tyr463) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核因子κB激酶alpha抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人原代支氣管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J | U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human |
人虹膜色素上皮細(xì)胞HIPEpiC | 293E細(xì)胞，穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CTLA4 Ig-24細(xì)胞 CL-0286M1(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
1.使用人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響人原代支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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