大鼠成骨原代細胞

大鼠成骨細胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結構，構成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域，分泌酸性物質溶解礦物質，分泌蛋白酶消化骨基質，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質，骨基質礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。

產品名稱：大鼠成骨細胞

組織來源：顱骨組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠成骨經ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

小鼠三腺原酸(T3)試劑盒

People in morphine peptide -2 (EM-2) ELISA Kit 人內嗎非肽-2(EM-2)試劑盒

Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISAKit 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

GuineaPigadvancedglycationendproducts,AGEs試劑盒豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量試劑盒20次

Mousec-junELISAKit小鼠c-jun試劑盒規格：96T/48T

豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 ，英文名： CCK ELISA Kit

Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白

細菌銅ATP酶(Cu++-ATPase)活性比色法量試劑盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規格：96T/48T

人總鐵結合力（TIBC）試劑盒   96T/48T

人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒   96T/48T

人總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒   96T/48T

人總蛋白（TP）試劑盒   96T/48T

BMP2重組斑馬魚 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關因子2抗原

ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽) Protein

ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標簽)

TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽)

A498細胞，人腎癌細胞系 蝙蝠肺細胞,Tb 1 Lu細胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細胞)  Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)     HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞 小鼠成纖維細胞， 豬原代氣管上皮細胞 人原代腦血管周細胞

大鼠成骨原代細胞phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原

CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標簽)

NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經酶 (Neuraminidase / NA) Protein

PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白

EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。