大鼠骺軟骨原代細胞

大鼠骺軟骨細胞分離自骨骺生長板；骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織，其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大，最終被骨組織所替換，對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形，染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內，這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，骺軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，骺軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

產品名稱：大鼠骺軟骨細胞

組織來源：生長板組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骺軟骨采用膠原酶-蛋白酶聯合消化并軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠骺軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒 進口分裝

HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒

組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒

魚免疫球蛋白M(IgM)試劑盒

Human collagen aoaibody (CLA) ELISA Kit 人抗膠原蛋白抗體(CLA)試劑盒

PorcineAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforADRA1A(Mouseadrenergicalpha-1Areceptor)ELISAKit小鼠能a1A受體

血液乙醇脫氫酶IV活性比色法定量試劑盒20次

MouseSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)試劑盒

豬白介素1(IL-1)ELISAKit   ELISA. 

豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit   ELISA. 

豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISAKit   ELISA. 

豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.

THPO重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽) Protein

ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2 0.5mgChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2) 毒蕈堿型乙酰受體M2(抗原)

ELK1重組人 ELK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

AK2 Protein Human 重組人 AK2 / Adenylate kinase 2 蛋白 (His & GST 標簽)

FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白 (His & Fc 標簽)

CA12 Others Human 人 CA12 人細胞裂解液   真皮成纖維細胞Many   CD7 Others Human 人 CD7 人細胞裂解液   IGFBP5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (His 標簽) 小鼠原代子宮成纖維細胞 大鼠原代子宮內膜上皮細胞

大鼠骺軟骨原代細胞胰淀素(IAPP)重組蛋白 Recombinant Islet Amyloid Polypeptide (IAPP)

ACVRL1 Protein Human 重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽)

TFPI重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽) Protein

M. VIRIDIFACIENS NA Protein M.viridifaciens 重組綠色小單孢菌 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽)

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein