詳細介紹
大鼠脊髓微血管內皮原代細胞
大鼠脊髓微血管內皮細胞分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的最微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數量極多,成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米。基膜外面有薄層結締組織,其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。最細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔,較粗的毛細血管由2~3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管,內皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續毛細血管;分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,(孔徑800~1000埃),稱有孔毛細血管;分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管,管腔擴大,稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細(8~10微米)、數量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,由單層內皮細胞構成,內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙;肝血竇內皮細胞是不連續的,有較寬的細胞隙(0.1~0.5微米);肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細血管大,較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞,脾血竇內外有巨噬細胞,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質,是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。
英文名稱 | Rat Spinal Cord Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 脊髓 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8235 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:大鼠脊髓微血管內皮細胞
組織來源:脊髓
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠脊髓微血管內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的優良培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的大鼠脊髓微血管內皮采用蛋白酶 - 膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠脊髓微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA 試劑盒
Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)試劑盒
Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)試劑盒 進口分裝
HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1試劑盒人CXC趨化因子受體1(CXCR1)試劑盒
組織ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒
HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞P35蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒規格:96T/48T
豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒
Human ai SS-A/Ro aibody ELISA Kit 人抗SS-A/Ro抗體試劑盒
PorcineIerleukin1β,IL-1βELISAKit 豬白介素1β(IL-1β)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAIFELISAKit大鼠凋亡誘導因子
血液牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴增試劑盒20次
MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISAKit小鼠特異生長因子/相關因子(TGSF)試劑盒
NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽) Protein
PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT),Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標簽) Protein
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標簽)
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 HAVCR1 Others Canine 狗 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細胞裂解液 CM-M088小鼠破骨細胞原代神經膠質細胞培養特制添加劑 小鼠原代脂肪微血管內皮細胞 小鼠原代腎周細胞
大鼠脊髓微血管內皮原代細胞抑制素βE(INHβE)重組蛋白 Recombinant Inhibin Beta E (INHbE)
IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白 (His & Fc 標簽)
IL1RAPL1重組人 IL-1R8 / IL1RAPL1 蛋白 Protein
GFP Protein Aequorea victoria 重組水母 GFP 蛋白
HA重組甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。