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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
普諾賽實驗室分離的大鼠脾淋巴采用機械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
普諾賽實驗室分離的大鼠脾淋巴細胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脾淋巴原代細胞 | 組織來源 | 脾臟 |
英文名稱 | Rat Splenic Lymphocyte Cells | 貨號 | YS-01X7537 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠脾淋巴細胞分離自脾臟組織；脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對，長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞器官。淋巴細胞(lymphocyte)白細胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當器官(有人認為在哺乳動物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
人整合素αⅤβ3(Iegrin αⅤβ3)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-j試劑盒j鏈(Ig-j)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
HumanleukocyteaigenC,HLA-CELISAKit人類白細胞抗原C(HLA-C)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 ，英文名： LTD4 ELISA Kit
Two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 人氧化酶(DAO)試劑盒
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit 兔主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBetaGAL(HumanAlpha-galactosidase)ELISAKit人β半乳糖苷酶
細菌鹽還原酶總活性比色法定量試劑盒20次
RabbitHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit兔熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T
G-250蛋白質(zhì)印跡膜快速染色試劑 2*100ml
TSFP1/SP1(transcription factor Sp1 0.5mgTSFP1/SP1(transcription factor Sp1) SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗原
MAPK8重組人 JNK1 / MAPK8 蛋白 (GST 標簽) Protein
ITIH3 Protein Human 重組人 ITIH3 蛋白 (Fc 標簽)
IL12B Protein Human 重組人 IL12B / P40 蛋白
CL-0442SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞) IFNA5 Others Mouse 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株 神經(jīng)母細胞瘤細胞,LAN-5細胞 PA317(鼠胚胎成纖維細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞 小鼠原代輸尿管成纖維細胞 人原代扁桃體靜脈平滑肌細胞
大鼠脾淋巴原代細胞肌原纖蛋白1(FBN1)重組蛋白 Recombinant Fibrillin 1 (FBN1)
CDH16 Protein Human 重組人 KSP-Cadherin / Cadherin-16 / CDH16 蛋白
S100A4重組小鼠 S100A4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NTRK1 Protein Canine 重組狗 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
STC2重組人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 Protein
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