大鼠氣管上皮原代細胞

大鼠氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環，缺口向后，各軟骨環以韌帶連接起來，環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。

產品名稱：大鼠氣管上皮細胞

組織來源：氣管

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

人優球蛋白(EL)ELISA 試劑盒

Human ansforming growth factor alpha (TGF- alpha) ELISA Kit 人轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒

HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORsELISAKit 人核仁形成區嗜銀蛋白(Ag-NORs)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerferonαAibody,IFNα-Ab試劑盒人抗α干擾素抗體(IFNα-Ab)試劑盒規格：96T/48T

組織精(arginine)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次

Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit人異檸檬酸脫氫酶(ICD)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠白介素1α(IL1α)試劑盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit

Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)試劑盒

rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質酸(HA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲狀腺微粒體抗體

線粒體復合物II蛋白表達ELISA定量試劑盒25次

Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒規格：96T/48T

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人腸三葉因子(ITF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Dickkopf1(DKK1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人11(KLK11)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)

FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)

CM-H051人胎盤滋養層細胞人膠質細胞(少突細胞)(HO) (1×106 )  SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 癌細胞,MDA-MB-157細胞 Ana-1(鼠巨噬細胞)  MDBK (NBL-1) 牛腎細胞  CL-0295MV3(人黑色素瘤細胞) 小鼠原代食管上皮細胞 小鼠原代胸腺上皮細胞

大鼠氣管上皮原代細胞肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。