大鼠胎盤間充質干原代細胞

大鼠胎盤間充質干細胞細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質干細胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細胞，是具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復過程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實用的組織修復種子細胞。相較于其他干細胞，胎盤間充質干細胞具有來源方便，細胞數量充足，易于分離、培養、擴增和純化，傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的佳來源。

產品名稱：大鼠胎盤間充質干細胞

組織來源：胎盤組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質干采用-膠原酶聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質干經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)試劑盒 ，英文名： TNFβ ELISA Kit

Mouse soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒

MouseEotaxin1ELISAKit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforhumanImmunoglobulinE,IgEELISAKitE

微型RNA(miRNA)文庫構建技術試劑盒5次

ELISAKitM-CSF大鼠巨噬細胞集落刺激因子

小鼠Ⅸ(FⅨ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor VIII related aigen (VIII -Ag) ELISA Kit 人Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒

Humanenkephalin,ENKELISAKit 人腦啡肽(ENK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCS試劑盒人17羥皮質類固醇(17-OHCS)試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母細胞線粒體內膜功能/膜電位測定試劑盒20次

MouseAquaporin1,AQP-1ELISAKit小鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒規格：96T/48T

小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)試劑盒   96T/48T

RSV-G重組人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 蛋白 (93% Homology) Protein

TLR3 (Toll-like receptor 3 0.5mgTLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原

GFPT1重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白 Protein

CSF1 Protein Human 重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白

SDF2 Protein Human 重組人 SDF2 蛋白

CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標簽)  C26瘤 結腸癌  小鼠胚胎成纖維細胞;MEF  SMMC-7721人肝癌細胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS  2. 皮膚細胞系統 小鼠原代胚胎成纖維細胞 小鼠原代皮膚成纖維細胞

大鼠胎盤間充質干原代細胞乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)重組蛋白 Recombinant Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽)

EFNA5重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白  Protein

NS2 Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2

IL17F重組人 IL-17F / IL17F 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。