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詳細介紹
人卵巢顆粒原代細胞
人卵巢顆粒細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內的大細胞群，也是主要的功能細胞，卵泡發(fā)育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖，而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起，尤其在卵泡發(fā)育后期，此外，顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成，維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環(huán)境。細胞形狀呈圓形或橢圓形。
英文名稱 | Human Ovarian Granulosa Cells | 組織來源 | 卵巢組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7577 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人卵巢顆粒細胞
組織來源：卵巢組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人卵巢顆粒采用先機械分離，而后膠原酶消化，后差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人卵巢顆粒經FSHR免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
GP2-293細胞，人胚腎上皮包裝細胞 大鼠腎小球系膜細胞EC(HBZY-1),HBZY-1細胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2 | ART3： 二0酸腺苷核糖基轉移酶3抗體 0.2ml |
Anti-HIV gp120 艾滋病病毒抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABHD1 肺α/β水解酶蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFITM1/CD225 干擾素誘導跨膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml |
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原) 0.5mg | HA tag(12CA5)： HA tag標簽單克隆抗體 0.1ml |
IgG/Cy5 Cy5標記的驢抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM160B1 FAM160B1蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
BC-020(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 大鼠腸上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
V79倉鼠肺細胞 V79 hamster lung cells RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS | FGF18 Protein Mouse 重組小鼠 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標簽) |
CHL 中國倉鼠肺細胞 | 大鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501 | 大耳山羊肺細胞;LDG-1 |
CL-0054Calu-3(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人卵巢顆粒原代細胞Rhesus antibody Rh IFITM1/CD225 干擾素誘導跨膜蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml |
長尾綠猴胚胎細胞;4179 | FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
UM-UC-3人膀胱移行細胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 直腸粘膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
HL-60, 人早幼粒白血病細胞 | Rhesus antibody Rh IgG/APC APC標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml |
TPO ELISA Kit 大鼠甲狀腺過氧化物酶 96T | CCL17 Protein Mouse 重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白 |
ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質激素(7-23)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2mg | E(Human estrogen) ELISA Kit 人雌激素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MNS1： 減數分裂特異核結構蛋白1抗體 0.2ml | BC-020(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
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