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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠髖臼軟骨采用膠原酶聯合蛋白酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠髖臼軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠髖臼軟骨原代細胞 | 組織來源 | 軟骨 |
英文名稱 | Mouse Acetabular Chondrocyte Cells | 貨號 | YS-01X8509 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠髖臼軟骨細胞分離自髖關節軟骨組織，髖關節是人體大、穩定的關節之一，是典型的球臼關節。髖關節既具有良好的內在穩定性，也具有靈活的活動性。髖臼位于髖骨外側面中央，呈半球形深凹，直徑約30-50mm，表面覆蓋厚約2mm的透明關節軟骨，呈半月形分布。中央是髖臼窩，無軟骨覆蓋，由哈佛腺充填，可以隨關節內壓力的增減擠出或者吸入關節液，以維持關節內壓力的平衡。髖臼邊緣的環形關節盂唇可以加深、加寬髖臼，使髖臼容納股骨頭的大部并處于穩定的位置，加強了髖關節的穩定性。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節軟骨表面平行，越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質弱嗜堿性，常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內，這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節軟骨細胞收縮為不規則形，在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每3-4天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：梭形、多角形
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠髖臼軟骨細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 |
前動力蛋白2抗體 | 6號染色體開放閱讀框222抗體 |
原癌基因FRAT1抗體 | 細胞周期G1的相互作用蛋白抗體 |
過敏毒素C3（補體C3）抗體 | 橋粒斑蛋白1抗體 |
1號染色體開放閱讀框104抗體 | 異質核糖核蛋白K抗體 |
MUC1 Others Human 人 Mucin-1 / MUC-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 | SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人細胞裂解液 (陽性對照) |
PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) | RETN Others Mouse 小鼠 Resistin / ADSF / RETN 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HAoEC-c 人主動脈內皮細胞(HAoEC) 500,000cells 腦成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CDK2 Others Human 人 CDK2 / p33 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-M007小鼠支氣管上皮細胞培養基100mL | 小鼠髖臼軟骨原代細胞細胞周期G1的相互作用蛋白抗體 |
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) | SNU-5(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人表皮黑色素細胞-中色素總RNAHEM-m NA | SELPLG Others Human 人 RPSGL-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人結直腸腺癌細胞;Caco-2 大鼠腸微血管細胞培養基 100mL | 11號染色體開放閱讀框53抗體 |
2抗體 | GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
特異性堿性蛋白Y2抗體 | 損傷誘導蛋白1抗體 |
棕櫚酰轉移酶GODZ抗體 | MUC1 Others Human 人 Mucin-1 / MUC-1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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