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大鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測試劑盒處理方式及事項
閱讀：349 發布時間：2019-3-8
大鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測試劑盒
處理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用，胃液、唾液*的采集時間是空腹采集，一般隔夜尿不采集；
2、采集血清時，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；
3、組織提取液、肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存備用；
4、采集血漿時一般不加抗凝劑，采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存備用；
5、不貼壁細胞(分泌性蛋白)，將培養基和細胞轉移至10ml離心管，500-800rmpx10min，吸取上清至另一10ml離心管中，10000rmpx10min，-20℃或4℃保存，作為標本進行檢測，如有需要可進行透析或純化處理。
檢測試劑盒基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
注意事項：
1.保用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
2.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
3.加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
4.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
5.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
6.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
7.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
8.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
9.底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。