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大鼠ELISA試劑盒其優點為
閱讀：114 發布時間：2018-6-6| 提 供 商 | 上海撫生實業有限公司 | 資料大小 | 80.5KB |
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大鼠ELISA試劑盒其優點為：
1. 相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的，處于天然狀態；
2. 蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的，可以避免人為的影響；
3. 可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。
實驗流程為：
1. 轉染后24-48 h 可收獲細胞，加入適量細胞裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑），冰上裂解30min, 細胞裂解液于4°C， zui大轉速離心30 min后取上清；
2. 取少量裂解液以備Western blot分析，剩余裂解液加1μg相應的抗體加入到細胞裂解液，4°C緩慢搖晃孵育過夜；
3. 取10μl protein A 瓊脂糖珠，用適量裂解緩沖液洗3 次，每次3,000 rpm離心3 min；
4. 將預處理過的10μl protein A 瓊脂糖珠加入到和抗體孵育過夜的細胞裂解液中4°C緩慢搖晃孵育2-4h，使抗體與protein A瓊脂糖珠偶連；
5. 免疫沉淀反應后，在4°C 以3,000 rpm 速度離心3 min，將瓊脂糖珠離心至管底；將上清小心吸去，瓊脂糖珠用1ml裂解緩沖液洗3－4次；zui后加入15μl的2×SDS 上樣緩沖液，沸水煮5分鐘；
6. SDS-PAGE, Western blotting或質譜儀分析。
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