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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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生物顯微鏡的四種校準(zhǔn)方法

時(shí)間:2022/11/12閱讀:1987
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生物顯微鏡是一種用來(lái)觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等也可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體的精密光學(xué)儀器。生物顯微鏡用來(lái)供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究院所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過(guò)程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。其光學(xué)技術(shù)參數(shù)包括:數(shù)值孔徑、分辨率、放大率、焦深、視場(chǎng)寬度、覆蓋差、工作距離等。這些參數(shù)并不都是越高越好,它們之間既相互聯(lián)系又相互制約的,實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)當(dāng)在保證分辨率的基礎(chǔ)上根據(jù)鏡檢的目的和實(shí)際情況來(lái)協(xié)調(diào)參數(shù)間的關(guān)系。
生物顯微鏡校準(zhǔn)方法
1、外觀方面
光學(xué)系統(tǒng)在整個(gè)視場(chǎng)內(nèi)成像應(yīng)清晰,視場(chǎng)內(nèi)不應(yīng)有影響觀察的陰影或反射光斑等,成像的清晰區(qū)域應(yīng)與視場(chǎng)同心。各部分運(yùn)動(dòng)應(yīng)靈活平穩(wěn),無(wú)卡滯和跳動(dòng)現(xiàn)象,視場(chǎng)內(nèi)照明均勻。
2、微調(diào)手輪刻線間隔量
微調(diào)手輪應(yīng)靈活平穩(wěn),松緊適中。微調(diào)手輪刻線間隔量應(yīng)測(cè)量手輪的起始、中間、末端三個(gè)位置。測(cè)量前,將指示表用專用夾具固定在生物顯微鏡上,保證指示表與顯微鏡緊固、牢靠,固定指示表時(shí)應(yīng)保證測(cè)量頭與載物臺(tái)垂直接觸。調(diào)節(jié)生物顯微鏡調(diào)焦手輪將指示表讀數(shù)置零。旋轉(zhuǎn)調(diào)焦手輪10個(gè)刻度,讀取示值,以指示值的1/10作為測(cè)量結(jié)果。將在起始、中間、末端三個(gè)位置上的測(cè)量平均值作為校準(zhǔn)結(jié)果。
3、目鏡標(biāo)尺的刻線間隔誤差調(diào)整
在對(duì)生物顯微鏡物鏡放大倍數(shù)誤差進(jìn)行校準(zhǔn)后,該項(xiàng)目可以不進(jìn)行計(jì)量校準(zhǔn)。具體校準(zhǔn)方法為在載物臺(tái)上放置分度值為0.01mm的標(biāo)準(zhǔn)玻璃刻度尺,安裝10倍顯微目鏡,調(diào)焦至目鏡視場(chǎng)清晰。調(diào)節(jié)顯微目鏡與標(biāo)準(zhǔn)玻璃刻度尺使二者端線對(duì)齊,并保證二者線紋刻度方向平行。
4、物鏡放大倍數(shù)誤差調(diào)整
調(diào)節(jié)光源至適度位置,將帶刻度分劃尺的目鏡安裝在生物顯微鏡其中一個(gè)套筒上,將標(biāo)準(zhǔn)玻璃刻度尺置于載物臺(tái)上,調(diào)節(jié)目鏡與標(biāo)準(zhǔn)玻璃尺使分劃尺刻線與標(biāo)準(zhǔn)玻璃尺刻線平行,避免出現(xiàn)測(cè)量誤差。調(diào)節(jié)載物臺(tái)使玻璃尺零位與分劃尺一端對(duì)齊,然后直接讀數(shù)。

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