對于紫外可見分光光度計而言在使用前必須要做基線校正，對于此項工作的原理和操作方法許多使用者的認識不盡相同；為此談談我們的認識。
1、為何要做基線校正？
大家都知道，紫外可見分光光度計的光學系統基本是由光源、單色器、檢測器等三部分組成的。在我們使用的波長區域中，上述部件在不同的波長下的響應值均不相同；通俗地說、即使沒有樣品，儀器如果不做基線校正，那么在190nm至1100nm的范圍中，吸光值或透過率不會是一條直線，這是一種客觀的物理現象。
2、被校正的基線種類和用途：
①系統基線：
所謂系統基線就是儀器固有的波長范圍的總基線；例如一臺紫外可見分光光度計出廠設計的波長全程范圍是190nm至1100nm，那么它的系統基線就是這個范圍。一般來講，作為分析人員對一臺儀器做全程掃描測試是比較少見的；之所以要做系統基線的目的一般是將儀器的光學系統的響應值校正到基本一致；這就類似馬拉松賽跑一樣，只要大家在同一起跑處比賽，前后差幾米出發無所謂。
②用戶基線：
所謂用戶基線就是分析者自己設定的測量波長區域的一段基線；由于這是分析所需要的區域，為了保證測試的準確性，故用戶基線的校正是非常重要和必要的；這就類似百米賽跑一樣，運動員要在同一個起跑線上比賽而不能搶跑，否則無法準確計算成績。
3、基線校正的方法
①系統基線：
系統基線的校正較為簡單，一般情況下樣品室內不放樣品，僅做光學系統的校正；如果一定要使用全波段的測量那另當別論。同時需要注意的是：系統基線無需經 常校正，一般半個月或一個月校正校正一次即可。對有的儀器來說，系統基線校正過于頻繁反而會造成基線漂移嚴重。
②用戶基線校正方法：
兩只比色杯盛有空白溶液分別放置在樣品及參比光路中，校正波長范圍要大于分析波長范圍；例如、分析設定范圍為220nm-500nm，那么校正波長就要設定為210nm-510nm；等待校正結束后再將波長設定回到原來的220nm-500nm范圍。
4、基線校正的注意事項：
①基線校正時要保證紫外可見分光光度計有一定的預熱時間；
②每更換一種參比溶液后均要重新做基線校正；
③如果參比溶液的吸光度大于樣品的吸光度值時測試結果會出現負值，此時要考慮使用何種溶液做基線校正了。
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