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上海吉至生化科技有限公司
主營產品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進口 100g |
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2021-9-9 閱讀(2760)
第一步：取適量組織樣本剪碎，加冷PBS，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體（或用液氮研磨），冰上靜置5分鐘，小心將上清吸入另一預冷的干凈離心管。
第二步：在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，棄上清。
第三步：每20ul細胞壓積中加入200μl冷的Buffer A，2ul蛋白酶抑制劑混合物，高速渦旋振蕩15秒，置冰上10分鐘。
第四步：再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，16000×g條件下離心5分鐘。
第五步：快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到胞漿蛋白，請置于冰上或-80℃冰箱保存備用。
第六步：在沉淀中加入200μl冷的Buffer B，2ul蛋白酶抑制劑混合物，高速渦旋振蕩15秒。
第七步：置冰上40分鐘，每隔10分鐘高速渦旋振蕩15秒。
第八步：在4℃，16000×g條件下離心10分鐘。
第九步：快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到核蛋白。
蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存備用。
acmec核蛋白提取試劑盒操作簡單、方便，從培養細胞或新鮮組織中提核蛋白、整個過程只需60分鐘即可將核蛋白和漿蛋白從細胞中分離出來。
