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技術文章

你用過Pacific Orange NHS Ester嗎?快來曬曬你的實驗成果!

閱讀:34          發布時間:2025-7-9

高效偶聯:琥珀酰亞胺酯(NHS酯)是用于生物分子標記的反應基團,可與蛋白質、抗體、核酸等生物分子中的伯胺(-NH2)反應,形成穩定的酰胺鍵。

熒光特性:作為一種紫色激發(405 nm)的熒光染料,其發射波長為551 nm,適用于多參數分析。

穩定性高:形成的共價鍵與蛋白質中的肽鍵一樣穩定。 

基礎知識概述:  

中文名:Pacific Orange 琥珀酰亞胺酯 

英文名:Pacific Orange NHS Ester,Pacific Orange Succinimidyl Ester 

分子式:C26H28N2O6

分子量:456.51 

規格標準:1mg、5mg、10mg 

試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司

相關應用:

1.流式細胞術:

用于細胞表面標記和細胞分選,可與多種抗體或蛋白質偶聯。

例如,用于標記死細胞,以便在流式細胞儀中區分活細胞和死細胞。

2.熒光顯微鏡成像:

適用于熒光顯微鏡成像,可用于細胞內蛋白質或核酸的標記。

3.生物偶聯:

通過NHS酯基團與生物分子中的伯胺反應,用于標記和檢測生物分子。

使用方法:

1.標記蛋白質或抗體:

溶解試劑:將Pacific Orange Succinimidyl Ester溶解在適當的緩沖液中(如PBS),制備工作濃度(通常為1-10 μg/mL)。

反應條件:將標記物與生物分子混合,在室溫下避光孵育30分鐘至1小時。

純化:使用凝膠過濾或透析去除未結合的染料。

2.流式細胞術標記:

細胞處理:將細胞收集并重懸于適當的緩沖液中。

染色:將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當濃度(如5 μM),加入細胞懸液中,室溫孵育15分鐘。

洗滌:用PBS洗滌細胞,去除未結合的染料。

檢測:使用流式細胞儀檢測,激發波長為405 nm,發射波長為551 nm。

3.熒光顯微鏡成像:

細胞固定與通透:用4%多聚甲醛固定細胞,然后用0.1% Triton X-100通透。

染色:將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當濃度(如1-10 μg/mL),加入細胞中,室溫孵育30分鐘。

洗滌:用PBS洗滌細胞,去除未結合的染料。

觀察:使用熒光顯微鏡觀察,激發波長為405 nm,發射波長為551 nm。

包裝:

638803253003324964615.jpg

質量控制:95%+

存儲條件:-20°C,避光,避濕

用途:僅供科研實驗使用,不用于診治

注意事項:取用一定要干燥,避免頻繁的溶解和凍干

取用:現配現用,將包裝從冰箱中取出,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,取用。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時放入冰箱。


相關試劑:

Alexa fluor 647 NHS ester TEA

Cypate hydrochloride

Patent Blue V calcium salt

Fluorescein Biotin

4,5-Diaminofluorescein

Coumarin-3-carboxylic Acid

Cyanine5 NHS ester iodide

Vari Fluor 680 SE

Vari Fluor 488 SE

Phenazine ethosulfate

BODIPY FL L-Cystine

Nile blue chloride

Rhodamine 6G hydrazide

5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein

5-Carboxytetramethylrhodamine 




供應商:陜西新研博美生物科技有限公司

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