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細(xì)胞基因表達(dá)分析增加了實驗數(shù)據(jù)的可靠性
閱讀：440 發(fā)布時間：2019-5-29
細(xì)胞基因表達(dá)分析增加了實驗數(shù)據(jù)的可靠性
細(xì)胞基因表達(dá)分析與芯片可以為眾多研究生成高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，其精心挑選的內(nèi)容提供超過180萬種預(yù)設(shè)計的引物/探針套裝，覆蓋超過30個物種，基于研究需求，通量和目標(biāo)數(shù)量，具有預(yù)配置，可配置或自定義選項等可用規(guī)格。
細(xì)胞基因表達(dá)分析核酸標(biāo)準(zhǔn)品與新一代測序文庫的稀有目標(biāo)檢測和定量，可以在進(jìn)行實時PCR反應(yīng)之前對DNA進(jìn)行擴增，它可以增加用于后續(xù)反應(yīng)的DNA而不改變樣本中DNA的相對量，該方法可以用來進(jìn)行單細(xì)胞研究。細(xì)胞基因表達(dá)分析通過將逆轉(zhuǎn)錄（RT）和實時PCR擴增（qPCR）結(jié)合為單一反應(yīng)，可以降低對樣本的操作步驟和總處理時間而獲得數(shù)據(jù)。該方法適于在很多樣本中篩查少數(shù)目標(biāo)的情況，或當(dāng)使用自動移液系統(tǒng)時。
細(xì)胞基因表達(dá)分析無需進(jìn)行核酸純化，使實驗方案顯著簡化并使樣本準(zhǔn)備過程簡化至僅需幾分鐘。單細(xì)胞分離的另一種方法是顯微操作，它利用玻璃微針，每次捕獲一個細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移到目的容器中。這個過程可手動開展，或通過自動化系統(tǒng)開展，適合低復(fù)雜度的樣品，但略顯沉悶。
細(xì)胞基因表達(dá)分析經(jīng)常被用來測定目的基因的表達(dá)情況。它的應(yīng)用依據(jù)是，具有穩(wěn)定表達(dá)的基因做內(nèi)參以糾正不同樣品間的誤差（除了要測定的表達(dá)之外的誤差，比如，可能是由于細(xì)胞活性、數(shù)量等造成的測量誤差）。但是這個方法因需要不同的報告基因做發(fā)光測定而需要加入兩或三種不同的底物，這就會因不同底物所需的佳實驗條件不同而造成測定相對嚴(yán)格的基因表達(dá)量時的誤差。
細(xì)胞基因表達(dá)分析可以用同一種底物發(fā)出不同顏色的光信號，更為重要的是因減少了反復(fù)加入淬滅液和不同底物的步驟，既提高了實驗效率，又減少了淬滅液對細(xì)胞造成的傷害，從而增加了實驗數(shù)據(jù)的可靠性。
細(xì)胞基因表達(dá)分析主要用于長時間的基因表達(dá)檢測（多可以同時檢測三種基因表達(dá)）、藥物刺激響應(yīng)、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)染效率等具體實驗，涵蓋了包括如晝夜節(jié)律、時鐘基因等方面研究的時間生物學(xué)，基因功能研究的細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)，醫(yī)藥研究和藥物研發(fā)的篩選和藥物遞送等多領(lǐng)域。細(xì)胞基因表達(dá)分析內(nèi)置溫度控制系統(tǒng)和CO2輸入系統(tǒng)，可以邊培養(yǎng)細(xì)胞邊監(jiān)測。