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D-螢光素 (D-Luciferin) 是熒光素酶的常用底物。D-螢光素利用熒光素酶報告基因在活體內表達產生的熒光蛋白發生化學反應產生熒光，從而使用高靈敏度的光學檢測儀器檢測動物活體體內的細胞活動和基因行為，普遍應用于生物領域，特別是生物活體成像技術。
問題答疑
Q:D-熒光素鉀鹽與D-熒光素鈉鹽、D-熒光素的區別
A:D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽以及D-熒光素的主要區別體現在它們的溶解和分散性能上。D-熒光素是游離態，D-熒光素鈉鹽和D-熒光素鉀鹽是鹽形式，游離態的D-熒光素難溶于水，需要酸堿進行助溶，難以應用于生物活體，鹽形式更易溶于水，能滿足實驗劑量需求。與熒光素鈉鹽相比，D-熒光素鉀鹽在水和緩沖液中的溶解度較高，且溶解速度較快，因此在一般的生物學試驗中，D-熒光素鉀鹽常被選用。
Q:D-熒光素鉀鹽的適用場景
A:D-熒光素鉀鹽作為活體成像底物，活體體內穩定表達熒光素酶是D-熒光素鉀鹽作為活體成像底物應用的關鍵前提。只有在熒光素酶存在并穩定表達的情況下，D-熒光素鉀鹽才能發揮其在活體成像中的重要作用。
D-熒光素鉀鹽可以做細胞實驗，且無需裂解液。D-熒光素鉀鹽本身是粉末，成分單一，不包含裂解成分。D-熒光素鉀鹽具有出色的水溶性和脂溶性，這使其能夠輕松穿透細胞膜和血腦屏障這一特性使得D-熒光素鉀鹽能夠迅速進入細胞內部，與細胞內的熒光素酶發生反應，從而產生明亮的發光信號。
D-熒光素鉀鹽可以用于干細胞示蹤的活體成像，
干細胞標記主要有兩種形式：
a. 慢病毒標記神經干細胞。慢病毒標記神經干細胞是一種常見的標記手段，通過將熒光蛋白基因整合到慢病毒載體中，并感染神經干細胞，可以使干細胞表達熒光蛋白。
b. 可標記組成性表達的基因，做成轉基因小鼠，從該小鼠的骨髓取出已標記的造血干細胞。
在這種方法中，研究者將熒光蛋白基因插入到小鼠的基因組中，使其在小鼠的所有細胞中組成性表達。從這種轉基因小鼠的骨髓中取出的造血干細胞自然攜帶熒光蛋白標記。
