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利用氣相色譜-質譜聯用法分析嫁接紅茶香氣變化的化學計量學方法
閱讀：1014 發布時間：2020-12-9摘要：開發出一種固相微萃取 (SPME) 和氣相色譜/三重四極桿質譜 方法，用于分析嫁接紅茶樣品。使用 Agilent MassHunter Profinder 和 Agilent Mass Profiler Professional (MPP) 軟件進行數據提取和統計分析。對鑒定或初步鑒定的特征揮發性化合物進行主成分分析和層次聚類分析，以揭示不同茶葉樣品之間的差異。
前言：茶 (Camellia sinensis) 是一種是流行的飲料，在中國尤其受到歡迎。作為感官品質的關鍵指標之一，茶香氣是揮發性組分的體現。嫁接是茶樹繁殖和品種改變中廣泛使用的技術。由于替換砧木后接穗中的次級代謝產物可能發生變化，因此移植后可能發生揮發性組分的變化[1,2]。氣相色譜-質譜 (GC/MS) 與化學計量學結合，是研究和揭示茶樣品中揮發性和半揮發性化合物的復雜混合物變化的有效技術。在本研究中，為揭示嫁接引起的香氣特征差異，將固相微萃取 (SPME) 與掃描模式下的 GC/QQQ 和化學計量學方法相結合，對由非嫁接和嫁接英紅 9 號（中國廣東省流行的一個茶樹品種）制得的紅茶樣品中的揮發性組分進行提取和分析。利用 Agilent MassHunter Profinder 軟件提取化合物信息并將數據導出為化合物交換文件（cef 文件）。為了以良好的重現性獲得特征揮發性化合物的數據矩陣，利用生物信息學數據挖掘和化學計量學分析軟件 Agilent Mass Profiler Professional (MPP) 進行樣品保留時間對齊和數據過濾 [3,4]。對所得的化合物進行主成分分析 (PCA) 和層次聚類分析 (HCA)，以鑒定各種茶葉樣品之間的差異。
實驗部分：茶葉樣品用非嫁接英紅 9 號 (CK) 以及四個不同品種的茶樹（包括白毛 2 號 (BM)、黑葉水仙 (HY)、黃枝香單樅 (HZX) 和五嶺紅 (WLH)）砧木上的嫁接英紅 9 號制備五組轉子紅碎茶（壓碎-撕裂-揉捻型）樣品（包括六個生物學平行樣品），如圖 1 所示。
SPME 條件稱取 3.5 g 紅茶樣品放入玻璃樣品瓶中，注入 10 mL 沸水，然后加入 10.0 µL 癸酸乙酯（溶于yi醚中，濃度為 0.2 µg/µL）作為內標。將樣品瓶密封并轉移至 60 °C 水浴中，保持 5 分鐘。用 DVB/CAR/PDMS-50/30 µm SPME 纖維在 60 °C 下萃取 40 分鐘。在 270 °C 下對 SPME 纖維脫附 4.5 分鐘。
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結論：使用 Agilent 7000D 三重四級桿氣質聯用儀 進行非靶向 GC/MS 分析，能夠提供信息豐富的數據，以便對嫁接紅茶進行分類和區分。Agilent MSD Productivity MassHunter 和 Agilent Mass Profiler Professional 軟件能夠自動挖掘并處理數據，以找出特征化合物。采用 PCA 和 HCA 基于鑒定出的化合物使五組樣品獲得了清晰的分離。結果表明嫁接影響紅茶的揮發性有機化合物特征，這一發現可能有利于指導茶樹繁殖中的砧木選擇。