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真核表達細胞常見表達載體有哪些

2021-1-18  閱讀(1024)

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  真核表達細胞表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質分子。
 
  原核基因表達調控與真核存在很多共同之處。但因原核生物沒有細胞核,亞細胞結構及其基因組結構要比真核簡單得多。
 
  1.原核基因轉錄調節特點
 
  ⑴σ因子識別特異啟動序列,不同的σ因子決定特異基因的轉錄激活,決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉錄。
 
  ⑵除個別基因外,原核生物絕大多數基因按功能相關性成簇的串聯、密集于染色體上,共同組成一個轉錄單位——操縱子。一個操縱子只含一個啟動序列及數個可轉錄的編碼基因。
 
  2.真核細胞結構及基因組結構遠比原核復雜,其基因表達調控機制發生在染色體活化、基因轉錄激活、轉錄后加工、翻譯及翻譯后加工等水平的調節事件也要復雜的多。
 
  真核細胞常見表達載體:
 
  1.pCMVp-NEO-BAN載體
 
  特點:該真核細胞表達載體分子量為6600堿基對,主要由CMVp啟動子、兔β-球蛋白基因內含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架構成,在大多數真核細胞內都能高水平穩定地表達外源目的基因。
 
  2.pEGFP,增強型絳色熒光蛋白表達載體
 
  特點:pEGFP表達載體中含有綠色熒光蛋白,在PCMV啟動子驅動下,在真核細胞中高水平表達。載體骨架中的SV40origin使該載體在任何表達SV40T抗原的真核細胞內進行復制。
 
  3.pEGFT-Actin,增強型綠色熒光蛋白/人肌動蛋白表達載體
 
  特點:pEGFP-Actin表達載體中含有綠色熒光蛋白和人胞漿β-肌動蛋白基因,在PCMV啟動子驅動下,在真核細胞中高水平表達。載體骨架中的SV40origin使該載體在任何表達SV40T抗原的真核細胞內進行復制。
 

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