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目的：

根據焦慮性抑郁疾病臨床多病因特點，采用慢性心理應激聯合藥物刺激建立一種焦慮性抑郁動物復合模型；并從動物行為學、血液生化學、組織形態學以及分子生物學等多方面多層次建立該模型的評價體系；采用近靈長類動物樹鼩建立一種更接近人類臨床的新型焦慮性抑郁動物模型。

方法：

1. 66 只 SD 大鼠隨機分為正常對照組、焦慮模型組、抑郁模型組、束縛應激 3 h 組、束縛應激 6 h 組、慢性情緒應激組，分別進行造模。于實驗第 14 d、21 d、28 d 造模結束后，采用高架十字迷宮和場景恐懼測試測定大鼠的焦慮樣行為，采用曠場測試和強迫游泳實驗測定大鼠的抑郁樣行為，Elisa 試劑盒檢測大鼠腦內單胺遞質 5-HT、DA 含量。

 

2. 120只SD 大鼠隨機分為正常對照組、溶媒對照組、焦慮模型組、抑郁模型組、束縛應激 6 h 組、皮質酮 40 mg/kg 組、束縛應激 6 h+皮質酮 20 mg/kg 組、束縛應激 6 h+皮質酮 30 mg/kg 組、束縛應激 6 h+皮質酮 40 mg/kg 組，分別進行造模。采用高架十字迷宮測試、曠場測試、強迫游泳實驗測定大鼠的焦慮和抑郁樣行為，Elisa 試劑盒檢測血漿 CRH、ACTH、CORT 含量，HPLC-ECD 法檢測腦內單胺遞質含量，HE 染色檢測 HPA軸各組織以及腦內海馬、杏仁核、前額葉皮質區的病理損傷情況，Western-blotting 法檢測腦內神經營養蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表達情況。

 

3. 12只中緬樹鼩隨機分為正常組、模型組、藥物組，模型組按照前期建立的焦慮性抑郁造模方法進行造模，藥物組于造模同時給予文拉法辛（6 mg/kg）進行干預，持續21 d。采用自主活動評分、糖水偏好實驗、Morris 水迷宮評價樹鼩的行為表現，Elisa 試劑盒檢測樹鼩血漿 CRH、ACTH、COR 含量，HPLC-ECD 法檢測樹鼩腦內單胺遞質含量，HE 染色觀察樹鼩腦內海馬、杏仁核、下丘腦等組織的病理損傷情況。

結果：

1. 優選出束縛應激 6 h（21 d）作為z佳的焦慮性抑郁心理應激模型束縛應激 3 h 組始終未見明顯的焦慮和抑郁樣行為，腦內 5-HT、DA 含量與對照組比較無差異；CES 組焦慮樣行為明顯，但在強迫游泳實驗中并未表現出抑郁樣行為，5-HT、DA 含量相比于對照組大鼠還有上升趨勢；束縛應激 6 h 組于造模 14 d開始表現出焦慮和抑郁樣行為，到 21 d 時行為表現趨于穩定，同時腦內 5-HT、DA 含量下降較為明顯，可作為z佳的焦慮性抑郁心理應激模型。

 

2. 采用慢性束縛應激 6 h 聯合皮質酮 30 mg/kg 的方法建立焦慮性抑郁動物復合模型，并構建該模型的多層次評價體系21 d 束縛應激聯合皮質酮 30 mg/kg 組大鼠進入開臂的時間、次數、曠場中自主活動次數均較對照組及抑郁組有顯著差異，強迫游泳不動時間較對照組及焦慮組顯著增加，焦慮樣和抑郁樣行為均十分明顯；同時，與對照組比較，該模型組大鼠血漿 CRH、ACTH、CORT 含量顯著上升，HPA 軸亢進；各腦區單胺遞質 5-HT、NE、DA 的含量和神經營養蛋白 BDNF、NGF、NT-3 的表達均明顯下降，單胺能系統失衡，神經營養缺失；此外，病理切片發現該模型組大鼠 HPA 軸以及各腦區均存在較為明顯的損傷。

 

3. 采用近靈長類動物樹鼩成功建立一種新型的焦慮性抑郁動物模型模型組樹鼩自主活動評分、糖水偏食度、學習記憶能力均明顯下降，血漿 CRH、ACTH、COR含量較正常組顯著上升，腦內單胺遞質含量下降，病理損傷明顯；給予文拉法辛干預后，模型樹鼩的行為表現得到改善，血漿 CRH、COR 含量下降，各腦區5-HT、NE、DA 含量均有一定程度的回升，其中以 5-HT   Z為顯著，符合該藥物提升腦內 5-HT和 NE 濃度的臨床治療機制，該藥物預見性研究證實焦慮性抑郁樹鼩模型建立成功。

結論：

綜上，本研究通過優選的心理應激模型聯合皮質酮注射，通過多濃度多時間點分析，終確定 21d 束縛應激 6 h 聯合皮質酮 30 mg/kg 能成功建立焦慮性抑郁動物復合模型；在此基礎上，從動物行為學、血液生化學、組織形態學以及分子生物學等多方面多層次綜合分析，建立了一套系統的該模型評價體系；然后進一步以樹鼩為研究對象，建立一種更接近人類臨床的新型焦慮性抑郁動物模型。