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東莞市景源實驗科技有限公司
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動物細胞培養的培養步驟

時間:2024/8/27閱讀:916
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動物細胞培養的培養條件

1、無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。

2、營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等)

3、血清和血漿(
提供細胞生長必須的營養成份)


4、溫度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4)

5、氣體環境(95%的空氣+5%CO?的混合氣體)

6、其中5%CO?氣體是為保持培養液的pH穩定

動物細胞培養的培養步驟

注:所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。

取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。

制備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將細胞接種至培養基,放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。

當細胞增殖達到一定程度,出現接觸抑制現象時,用胰蛋白酶再次處理,并用細胞懸液吹打貼壁生長的細胞。進行細胞計數。

依照計數結果,分瓶培養,進行傳代培養。獲得細胞系或細胞株。

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