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毓秀生物科技(上海)有限公司

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[供應]IHC免疫組化

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-06-04 21:00:06

有效期:2025年6月4日 -- 2025年12月4日

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IHC免疫組化是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)

IHC免疫組化操作步驟

⑴、石蠟切片脫蠟至水。

⑵、 3%H 2 O2 室溫孵育 5-10 分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性。

⑶、蒸餾水沖洗, PBS 浸泡 5 分鐘 x2 (如需抗原修復,可在此步后進行)。

⑷、 5-10% 正常山羊血清(PBS 稀釋)封閉,室溫孵育 10 分鐘,傾去血清,勿洗。滴加一抗 工作液, 37  孵育 1-2 小時或 4  過夜。

⑸、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑹、滴加適量 生物素標記二抗 工作液, 37  孵育 10-30 分鐘。

⑺、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑻、滴加適量的 辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素 工作液, 37  孵育 10-30 分鐘。

⑼、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑽、顯色劑顯色 3-15 分鐘(DAB  NBT/BCIP

⑾、自來水充分沖洗,蘇木素復染,脫水,透明,封片。

IHC免疫組化是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)
IHC免疫組化原理

免疫組織化學利用了抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來,以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性,定位或定量的研究。

 

IHC免疫組化結果判定:

陽性組織為棕色(DAB顯色)或是紫紅色(NBT/BCIP)著色

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