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本生(天津)健康科技有限公司
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山羊低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒實驗使用說明書

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  以下是山羊低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒的綜合使用說明,整合自多個廠商的標準化操作流程:

  BS-3859 山羊低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 天津本生試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:包被微孔板的捕獲抗體與樣本中LDL結合后,再與HRP標記的檢測抗體形成復合物,經TMB顯色后通過450nm吸光度定量。

  二、試劑盒組成

  典型配置包括:

  酶標包被板(48T/96T)

  標準品(濃度梯度通常為0-48ng/ml)

  酶標試劑(HRP標記抗體)

  顯色劑A/B液(TMB溶液)

  終止液(酸性溶液)

  20-30倍濃縮洗滌液

  樣品稀釋液及封板膜

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:

  采集后室溫靜置10-30分鐘,2000-3000g離心20分鐘取上清

  避免溶血或反復凍融(建議分裝保存于-20℃)

  組織勻漿?:

  按1:9比例加入PBS勻漿,3000g離心10分鐘取上清

  細胞上清?:

  3000g離心10分鐘去除顆粒物

  四、操作步驟

  試劑準備?:

  所有試劑需平衡至室溫(18-25℃)

  濃縮洗滌液需用蒸餾水稀釋

  加樣?:

  每孔依次加入標準品/樣本50μL→酶標試劑50μL→37℃孵育60分鐘

  洗滌?:

  棄液后拍干,每孔加滿洗滌液靜置30秒,重復5次

  顯色?:

  加入顯色劑A/B各50μL,37℃避光反應15分鐘

  終止與檢測?:

  加終止液50μL,15分鐘內測定450nm OD值

  五、注意事項

  不同批次試劑不得混用

  顯色劑B需避光保存

  標準曲線需每次實驗重新制備

  OD值>2.0時需稀釋樣本復測

  精密度要求:批內CV<10%,批間CV<12%

  六、結果計算

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,通過回歸方程計算樣本濃度。典型檢測范圍為0.17-4.2mmol/L。

  注:以上資料僅供參考,具體操作參數請以實際試劑盒說明書為準,不同廠商可能存在細微差異。

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