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Elisa操作—加顯A顯B 過程
  • 發(fā)布時間2024-02-27
  • 播放次數(shù)219次
視頻簡介

  Elisa操作—加顯A顯B 過程

  ELISA試劑盒是一種常用于生物分子檢測的實驗工具,中文簡稱酶聯(lián)免疫吸附實驗。ELISA試劑盒通常包括特定抗體、酶標(biāo)記的二抗、底物等多種生化試劑,可用于檢測血清、尿液、唾液、細(xì)胞、組織等生物樣品中的蛋白質(zhì)、肽、荷爾蒙、抗體、細(xì)胞因子、病毒等生物分子。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。

  產(chǎn)品特點

  1、高效、靈敏、特異的抗體;

  2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;

  3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;

  4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;

  5、節(jié)省實驗經(jīng)費。

  ELISA操作步驟

  1、包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標(biāo)板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。

  2、洗滌:棄包被液(用力拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。

  3、封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。

  4、洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。

  5、結(jié)合一抗:用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢血清,每孔100μl,要設(shè)立陰性對照,37℃孵育1.5h。

  6、洗滌:同上。

  7、結(jié)合酶標(biāo)二抗:每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同,可按說明書進(jìn)行)50μl,37℃孵育1h。

  8、洗滌:同上。

  9、顯色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室溫避光顯色10min。

  10、待顯色后,每孔加入50μl終止液(2mol/L H2SO4)終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值,以確定血清抗體水平。



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