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    倒平板的小技巧

    閱讀:1525        發(fā)布時(shí)間:2022-01-13
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         在生物實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常需要倒平板,初學(xué)者往往倒不好,導(dǎo)致后繼實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)問題。今天,小施總結(jié)幾點(diǎn)倒平板小技巧供大家參考。

    培養(yǎng)基傾注溫度

    1、培養(yǎng)基傾注適宜溫度約45℃。如果手心接觸裝培養(yǎng)基的三角瓶不燙,手背接觸燙,此時(shí)的溫度在45度左右,適合倒平板。培養(yǎng)基傾注時(shí)溫度太高的話,凝固時(shí)間較長,另外皿蓋上會有大量冷凝水,不利于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。溫度太低,則容易出現(xiàn)倒板過程中瓶中培養(yǎng)基部分凝固的現(xiàn)象。如果要連續(xù)倒多個(gè)皿,尤其是在冬天,非常容易凝固,一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化。所以建議此時(shí)開個(gè)50度的恒溫水浴,隨時(shí)可把裝培養(yǎng)基的三角瓶放進(jìn)去加熱,效果會更好。

    2、有些培養(yǎng)基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應(yīng)先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結(jié)或形成片狀物。

    3、目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基滅菌后會放置水浴或者烘箱中,需使用的時(shí)候拿出來直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時(shí)間不宜過長,靜置時(shí)間一般不超過4小時(shí)。靜置時(shí)間過長,培養(yǎng)基中瓊脂可能會少量凝固,形成類似絮狀析出。

    培養(yǎng)皿中有冷凝水

    培養(yǎng)皿中有冷凝水,如果只有幾滴,則影響不大,如果過多則需要引起注意。

    1、倒皿前將平皿最好保持在35℃-40℃的溫度(觸手有溫?zé)岣校?/span>

    2、當(dāng)需要表面接種時(shí),有冷凝水的平板表面容易產(chǎn)生蔓延菌落。這時(shí)可放在有對流的無菌凈化臺中吹干培養(yǎng)基表面,但不能過度干燥,否則培養(yǎng)過程中平板容易開裂。 
    3、如果是進(jìn)行傾注平板計(jì)數(shù),則可在凝固后的瓊脂表面再覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基即可。

    平板傾注量

    一般平板傾注量在18-20mL左右,如果培養(yǎng)時(shí)間超過48小時(shí)或者是培養(yǎng)溫度高于40℃,為防止水分過量蒸發(fā)導(dǎo)致平板開裂,傾注量一般是25mL左右。傾注平皿時(shí)左三圈、右三圈的輕輕晃動,注意避讓平皿蓋。

    平板氣泡

    倒板過程中容易出現(xiàn)氣泡,特別是像BS瓊脂這類需要搖勻后倒板的培養(yǎng)基。氣泡過多的話會影響結(jié)果觀察,所以在實(shí)驗(yàn)操作中盡量避免或減少氣泡。

    1、加熱時(shí)培養(yǎng)基融化即可,避免溫度過高產(chǎn)生氣泡。

    2、倒平板時(shí)盡量貼著平皿壁緩慢倒入,將氣泡留在瓶子底部。

    3、如果平板中有少量氣泡的話,可以把氣泡輕搖到平板壁上,這樣不會影響結(jié)果觀察。


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