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穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系篩選

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一、實驗介紹

　　將我們所要的目的基因整合到宿主細胞上，隨著細胞的生長繁殖，目的基因可以穩(wěn)定的表達，在通過抗生素的不斷加壓篩選，最終得到構建穩(wěn)定細胞系的過程。

　　

二、實驗目的：

　　獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。

　　

三、實驗步驟

　　

 

四、實驗結果展示

　　

五、送樣運輸要求：

1 凍存細胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴密，凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內(nèi)干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無孔。

2. 生長狀態(tài)良好的細胞，細胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶內(nèi)舊培養(yǎng)基，添加新培養(yǎng)基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當?shù)暮袃?nèi)，盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低于10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細胞培養(yǎng)條件備注完整，如培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度，FBS用量等。

4. 備注：運送時間原則在4天以內(nèi)，如細胞生長速度快，則加入的培養(yǎng)基血清可以減半，細胞密度在20%-30%。