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c18固定相在反相方面常用的原因及其工作原理

閱讀:3061      發布時間:2022-6-8
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        將C18 固定相稱為用的最多的化學物質之一可能更合適。在色譜柱供應商中,這一階段的不斷增長的品種肯定不少。然而,在我們深入研究手頭的主題之前,這里簡要回顧一下 C18 固定相是如何產生的。

        一、反相色譜

        隨著更多科學家參與反相色譜該領域,色譜中引入了額外的分離模式,以分離和純化許多不同基質中的多種化合物。在色譜中,首先從色譜柱中洗脫的是離子型和強極性分析物,疏水性更強的分析物其次。與 Tsvet 的實驗相比,這些化合物以相反的順序洗脫。因此,該系統被稱為“反相”色譜。

        RP 技術的最終目標是分離具有不同疏水程度的分析物。簡而言之,此任務通過以下方式完成:

        1、通過疏水固定相來保留分析物。

        修改和優化具有不同能力的多組分溶劑系統,作為目標分析物的良好溶劑。這包括有機溶劑和緩沖溶液(如果適用)。并非所有化合物都是強酸性或強堿性,而是可能具有需要窄 pH 范圍來控制其行為的極性基團。恒譜生反相色譜柱具有很廣泛的 PH 適用范圍, 在 PH 條件下非常耐用。對于低 PH 應用,在 pH 1.8 的 條件下連續進樣 1500 次的實驗表明該液相色譜柱具有良好的穩定性和重現性。

 色譜分析柱-SC_9646

        碳氫化合物是疏水性的例子,實際上是油性物質。更具體地說,直鏈烷烴非常適合用作良好的固定相。我們應該注意到,隨著鏈中碳原子的增加,碳氫化合物的物理性質也會發生變化——C1 到 C4 是氣態的;C5-C17 是液體;C18 和更大的是固體。除了烷烴之外,還有其他候選物,例如芳烴和環狀烷烴,在這里也可以作為固定相使用。C18 的流行可能是由于用于鍵合工藝的起始材料的早期可用性。這個幸運的巧合導致進一步發現 C18非常適合色譜過程,無論哪種方式。恒譜生的c18色譜柱被廣泛應用各種化合物分析,是客戶使用廣泛的產品之一。

 液相色譜柱

        2、將烷烴基團,特別是 C18 或十八烷基,連接到合適的表面上。二氧化硅的性能優于所考慮的所有其他介質,二氧化硅顆粒有多種形狀(規則球形或不規則)、尺寸(0.9 o 10 µm 或更大)、孔隙率(大至 1000 Å),并且是全多孔或在設計上具有堅實的核心。

        3、鍵合過程完成后,C18 配體在分子水平上附著在二氧化硅上,并在二氧化硅顆粒孔內進行更通用的物理放置。

        4、 C18 固定相的優點和簡單性在于它提供了非常簡單的疏水相互作用。當流動相中的溶質穿過二氧化硅孔時,它們可以通過相當弱的疏水相互作用被烴類吸引和保持。

        5、在一般實踐中,恒譜生建議將流動 pH 設置為分別高于或低于 pK b或 pK a 2 個單位,以確保化合物以一種最有可能保留在色譜柱上的形式存在。當然,幾乎所有事情和每條規則都有例外。

        至此,我們只介紹了流動相的一種成分,特別是水性部分。這導致我們使用多種化學特性來幫助提高分析物在 C18 固定相上的保留。

        總之,C18 是可用于反相色譜的簡單、方便的固定相之一。

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