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上海創凌生物科技有限公司>技術文章>Zeta Life 轉染試劑高效率轉染RAW 264.7細胞方法總結

技術文章

Zeta Life 轉染試劑高效率轉染RAW 264.7細胞方法總結

閱讀:1780          發布時間:2020-3-26

在6孔板中用Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑高效率轉染RAW 264.7細胞方法總結。

實驗方案如下:

一、質粒DNA準備

1、質粒DNA濃度700ng/ul(注意:①溶解于無菌雙蒸水或超純水;②無內毒素),

二、操作流程

1、先將細胞接種到6孔板細胞培養板,細胞匯合度在70%左右,再進行轉染。

2、復合物制備:將質粒DNA與Zeta Life Advanced Transfection Reagent 貨號AD600150轉染試劑按照1:1(12ug:12ul)關系直接混合,用移液器吹吸10-15次混勻,室溫靜止10-15分鐘。

3、將復合物加入*培養基的細胞培養板,并輕輕混勻,放入培養箱中繼續培養(不建議把復合物加入到無血清的培養基里面,后期會進一步摸索此條件)。

4、轉染24小時后對細胞進行正常換液。

5、質粒DNA轉染48小時后熒光檢測轉染效率

下圖是用Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑轉染raw 264.7細胞的熒光和明場圖片

 

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三、美國Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑信息:

產品名稱

貨號

規格

數量

報價

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD600025

0.25ML

1

1590

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD600050

0.5

1

2390

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD600075

0.75

1

2890

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD600150

1.5ML

1

4490

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD600500

5ML

1

電詢

Advanced DNA RNA 轉染試劑

AD601000

10ML

1

電詢

四、RAW 264.7細胞簡述:

RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞. 此細胞株源自雄性Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒,XC斑點形成試驗陰性。 可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。 可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。

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