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上海創凌生物科技有限公司>技術文章>Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝

技術文章

Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝

閱讀:1312          發布時間:2021-10-14

產品貨號: B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10

產品規格: 2ml-kit4ml-kit、10ml-kit

產品品牌:Biozellen

產品價格:詢價

產品概述:

Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝

 

Biozellen®基質膠 特點:

1、100%植物源材料,無任何動物成分;

2、胺基酸序列100%人源化 ;

3、可調控基質膠硬度進行多種細胞培養;

4、3D細胞/類器官培養種類數量范圍更廣;

5、無人畜共通病原菌或毒素風險;

6、適用于醫療級生物原料;

7、高活性、高純度、可融化;

82年保存時間;

93D培養結束后基質膠可以溫和融化,并保留3D細胞/類器官結構完整性;

Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝

Catalog No.   B-P-00003-2B-P-00003-4、B-P-00003-10                

Specification  2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

Storage       Store at-20℃. 1年保存

 

一、產品描述

Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑,可進行3D類器官培養與微環境等相關實驗應用; 本試劑盒操作便利且可調控膠體硬度進行多種類器官培養測試;高分子膠體可快速形成水凝膠, 建議操作此培養膠體前詳讀此使用指南。

Biozellen®3D類器官培養基質膠材料為植物來源,無動物成分)

、應用

• 3D類器官培養。

適合用于3D類器官藥物篩檢平臺

三、適用細胞種類

原代細胞

干細胞

四、試劑盒組分


B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
(對應數量和內容)

貨號.

Components

Amount

Content

B-P-00003-A

基質膠 (2X)

4、820

0.5mL / tube

B-P-00003-C

緩沖溶液 (10X)

       1、2、1

1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT

B-P-00003-D

緩沖溶液 (10X)

       1、21

1*10ml2*10ml1*50 mL / BT

五、使用步驟:

A.試劑制備

A基質膠:將A基質膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘, 確認*融解.

C緩沖溶液(1X)制備:使用前將10X C緩沖溶液用冰的無細胞培養液(例如: 無血清DMEMopt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

緩沖溶液(1X)制備使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B.Biozellen®3D類器官培養基質膠的制備

全部步驟需要在無菌環境內操作,操作步驟如下:

1. 24孔培養板放置于冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合,并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。

注:請選擇適當的培養溶液與條件進行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。

3. 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上,膠體將于 5 分鐘內成膠。 注測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

4.待膠體成膠后,添加1毫升冰的1X C緩沖溶液,并蓋過步驟的膠溶液,固定 15 分鐘。

5.15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養基溶液。

6將含有細胞的膠于37°C 二氧化碳培養箱內進行7~14天的培養,并觀察細胞球體的形成,按正常培養基更換頻率進行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序

小心的將培養基吸取移除,并用1X PBS進行清洗。

小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5分鐘。

溫和的用1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

將含有細胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心10分鐘,移除上清液體并收集細胞球體做分析。  

D、收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于37°C混合反應。

2. 1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。

3. 待細胞球體*分解,加入3倍體積的1X PBS,并用1000轉的轉速進行離心10分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。

六、案例分享

A.形成3D腫瘤球體成功案例分享

 

圖片2.png

 B.Biozellen基質膠被溶解后分離的完整3D細胞結構照片

圖片3.png

 

培養后的3D細胞球體, 在Biozellen基質膠被試劑盒里面的

D Buffer溶解分離后仍然可以得到完整的3D細胞結構

 


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