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Biozellen系列3D類器官培養基質膠應用
閱讀：850 發布時間：2022-1-18
3D類器官培養基質膠
一、產品優勢
1、基質膠為植物源：
A.無人畜共患病的病原菌或毒素污染
B.氨基酸序列100%人源化
C.成本低且易規模化大量生產
D.3D培養結束后基質膠可以融化
2、可用作醫療生物原料：
A.高安全、低過敏
B.高活性、高純度
C.最是適合人體研究
3、符合人體癌藥篩檢：
A.低成本且穩定
B.3D癌組織培養系統
C.可用于精準人體癌藥篩檢
4、滿足生物原料需求：
A.自產關鍵原料
B.低成本
C.降低批次差異
D.人源化原料更精準
二、應用
• 3D 類器官培養。
• 適合用于 3D 類器官藥物篩檢平臺
三、適用細胞種類
• 原代細胞
• 干細胞
四、試劑盒組分
五、使用步驟：
A、試劑制備
A 基質膠：將A 基質膠溶于 37℃水浴槽回溫 10分鐘， 確認*融解.
C 緩沖溶液(1X)制備： 使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養液(例如：無血清 DMEM、 opt-MEM) 制
備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
B、Biozellen®3D 類器官培養基質膠的制備
全部步驟需要在無菌環境內操作，操作步驟如下：
1. 將 24孔培養板放置于冰上預冷。
2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合，并與 0.5毫升 37℃ A 膠按照
1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度105~107cells/mL。
注：請選擇適當的培養溶液與條件進行試驗，貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上， 膠體將于 5 分鐘內成膠。
注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。
4.待膠體成膠后，添加 1 毫升冰的1X C 緩沖溶液，并蓋過步驟 3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待 15分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養基溶液。
6將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養箱內進行7~14天的培養，并觀察細胞球體的形成，按正常培養基
更換頻率進行更換操作。
C、溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養基吸取移除，并用 1X PBS 進行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液，蓋過膠滴于室溫反應 5 分鐘。
溫和的用 1毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。
將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管，用1000 rpm的轉速離心 10分鐘，移除上清液體并收集細胞
球體做分析。
D、收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作
1. 添加 trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。
2. 用 1毫升移液管混合，直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解，加入 3 倍體積的 1X PBS，并用 1000 轉的轉速進行離心 10分鐘，并移除上清
液體收集沉淀的單細胞做分析。